①C列を選択し、「データ」メニュー→「データの入力規則」をクリックしまｓ。
②「入力値の種類」=「ユーザー設定」にします。
③数式は「=COUNTIF(C:C, C1)=1」にします。
入力規則の設定例
入力例（「あ」を2回入力した時にエラー）
